實驗目的:此次實驗主要是為了將小鼠樣品進行消化處理,以便得到活率較高的單細胞懸液;由于樣品實驗對轉(zhuǎn)速及溫度都有一定要求,故客戶選擇應(yīng)用上海凈信JX-CKSM-4WK系列單細胞懸液制備儀進行樣品前處理。
實驗器材:單細胞懸液制備儀JX-CKSM-4WK、消化酶、終止液、研磨套裝管、過濾管、PBS等實驗器材
小鼠樣品前處理的懸液制備實驗操作流程:
1.將準備好的小鼠樣品裝入培養(yǎng)皿中,加入適量的PBS溶液;機器開機進行預熱準備;
2.將培養(yǎng)皿中的樣品用手術(shù)刀剪碎,剪成米粒狀大小,然后裝入研磨套裝中,再加入準備好的消化酶試劑,將研磨套裝管裝入機器內(nèi);
3.選擇對應(yīng)樣品的對應(yīng)程序,待研磨消化好后取出樣品管,將樣品通過過濾管進行收集,再加入兩倍量終止液;
4.收集好的樣品進行顯微鏡鏡檢或者細胞計數(shù)儀檢查;
實驗操作注意事項:
由于消化酶在37度左右活性較好,故機器需要提前加熱準備,為保證樣品的活率,建議老鼠先高位截癱后再解剖取樣,樣品及時加入PBS緩沖液,在實驗獲取單細胞懸液的第一時間檢測活性;
小鼠樣品前處理的懸液制備實驗前后效果圖:
單細胞懸液制備儀對小鼠樣品的細胞懸液制備效果有由下圖可知,把收集好的樣品進行顯微鏡鏡檢或者細胞計數(shù)儀進行檢測分析,樣品制備效果符合客戶的實驗要求,不同樣品活率都不一樣。